നേരിട്ടുള്ള RT-qPCR കിറ്റ്
കിറ്റ് വിവരണം:
◮ ഫോറെസി റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റേസും ഫോറെസി എച്ച്എസ് ടാക്ക് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസും ഉപയോഗിച്ച് ഡയറക്ട് ആർടി-ക്യുപിസിആർ കിറ്റ്, അതുല്യമായ പ്രതികരണ ബഫർ ഉപയോഗിച്ച്, ഈ കിറ്റിനെ ശക്തമായ പ്രതിരോധവും അനുയോജ്യതയും ഉള്ളതാക്കുന്നു, കൂടാതെ ഇതിന് ഫോരെജീൻ ലൈസിസ് സിസ്റ്റം ടെംപ്ലേറ്റായി റിയാക്ഷൻ ഉപയോഗം നേരിട്ട് പരിശോധിക്കാനും കഴിയും.ഈ കിറ്റിന് കോവിഡ്-19 ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് ഡിറ്റക്ഷൻ കിറ്റിനും മറ്റ് രോഗകാരികളായ ബാക്ടീരിയ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് ഡിറ്റക്ഷൻ കിറ്റ് വികസനത്തിനും അപേക്ഷിക്കാം.
വിവരണം
നേരിട്ടുള്ള RT-qPCR കിറ്റ് പ്രത്യേകം പാക്കേജുചെയ്ത RT-qPCR ബഫറും ഉയർന്ന കാര്യക്ഷമതയുള്ള എൻസൈമും നൽകുന്നുമിശ്രിതം (Taq, M-MLV, RI), ബാക്ക്-എൻഡ് കിറ്റുകളും സിസ്റ്റവും സൃഷ്ടിക്കുന്നതിന് ഇത് സൗകര്യപ്രദമാക്കുന്നുക്രമീകരണം, ലളിതമായ സ്ഥിരീകരണത്തിനുള്ളിൽ.
സ്പെസിഫിക്കേഷനുകൾ
500T, 50,000T
കിറ്റ് ഘടകങ്ങൾ
| കിറ്റ് ഉള്ളടക്കങ്ങൾ (20 μL പ്രതികരണ സംവിധാനം) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 ടി | 50,000 ടി | |
| നേരിട്ടുള്ള എൻസൈം മിശ്രിതം | 500 μL× 1 | 50 മി.ലി× 1 |
| 2× ഡയറക്ട് RT-qPCR ബഫർ | 1 മി.ലി× 5 | 500 മില്ലി× 1 |
| നിർദ്ദേശം | 1 | 1 |
പ്രവർത്തന ഘട്ടങ്ങൾ
റീജന്റ് തയ്യാറാക്കുന്നതിന് മുമ്പ്, കിറ്റിലെ എല്ലാ റിയാക്ടറുകളും ഊഷ്മാവിൽ ഉരുകുകയും സൌമ്യമായി കലർത്തുകയും വേണം.
A: തയ്യാറാക്കുക of ടെംപ്ലേറ്റ് ഒപ്പം റിയാജന്റ്
1. തയ്യാറാക്കിയ RNA ടെംപ്ലേറ്റ് തയ്യാറാക്കുക (ആർഎൻഎ ടെംപ്ലേറ്റ് വേർതിരിച്ചെടുക്കാനും ശുദ്ധീകരിക്കാനും ഫോർജീൻ ടോട്ടൽ ആർഎൻഎ ഐസൊലേഷൻ കിറ്റ് സീരീസ് കിറ്റ് ഉപയോഗിക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു) അല്ലെങ്കിൽ സാമ്പിൾ ക്രാക്കിംഗ് ഉൽപ്പന്നം (ഫോറെജീൻ ലൈസിസ് സിസ്റ്റം ഉപയോഗിക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു), നിർദ്ദിഷ്ട പ്രൈമറുകൾ (10 μM) കൂടാതെ മറ്റ് പ്രസക്തമായ ഉപഭോഗവസ്തുക്കൾ, ഉപകരണം.
2. 2× ഡയറക്ട് RT-qPCR ബഫർ, RNase-Free ddH2O, 20× ROX റഫറൻസ് ഡൈ (ഇതാണെങ്കിൽ'ആവശ്യമാണ്) ഐസ് ഉള്ള ബോക്സിൽ, ഇവ സ്വാഭാവികമായി ഉരുകുകയും സൌമ്യമായി കലർത്തുകയും ചെയ്യുന്നു.
B: തയ്യാറാക്കുക of RT-qPCR സിസ്റ്റം
മേശ 1 : തയ്യാറാക്കുക of RT-qPCR sസിസ്റ്റം
| ഘടകം | വ്യാപ്തം | അന്തിമ ഏകാഗ്രത |
| 2× ഡയറക്ട് RT-qPCR ബഫർ | 10 μL | 1× |
| നേരിട്ടുള്ള എൻസൈം മിശ്രിതം | 1μL | |
| ഫോർവേഡ് പ്രൈമർ (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| റിവേഴ്സ് പ്രൈമർ (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| അന്വേഷണം(4 μM) | 1μL | 200nM |
| ടെംപ്ലേറ്റ്(ആർഎൻഎ അല്ലെങ്കിൽ ലൈസേറ്റ്) | X μL | |
| 20×ROX റഫറൻസ് ഡൈ | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| ആകെ വോളിയം | 20μL |
C: സജ്ജമാക്കുക ദി RT-qPCR പ്രതികരണം പ്രോഗ്രാം
മേശ 2 : RT-qPCR റിയാക്റ്റിon പ്രോഗ്രാം ക്രമീകരണം (വേണ്ടി ഉദാഹരണം: രണ്ട്-ഘട്ടം രീതി)
| ഘട്ടം | താപനില | സമയം | സൈക്കിളുകൾ | ഉള്ളടക്കം | |
| 1 | 50℃ | 15 മിനിറ്റ് | 1* | 1 | റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ |
| 2 | 95℃ | 1 മിനിറ്റ് | 1 | പ്രീ-ഡീനാറ്ററേഷൻ | |
| 3 | 95℃ | 10 സെ | 40-45 | ഡീനാറ്ററേഷൻ | |
| 60℃ | 30 സെക്കന്റ് 2* | Anneal/Extension | |||
സംഭരണവും ഷെൽഫ് ജീവിതവും
കിറ്റ് -20-ൽ സൂക്ഷിക്കണം± 5℃.കാലാവധി 12 മാസമാണ്.
ആവർത്തിച്ചുള്ള ഫ്രീസ്-ഥോ സൈക്കിളുകൾ (<5 സൈക്കിളുകൾ) ഒഴിവാക്കുക.
