ഞങ്ങൾ പരിചയസമ്പന്നരായ നിർമ്മാതാക്കളാണ്.ബിഗ് ഡിസ്കൗണ്ടിംഗ് ചൈന ഹൈ സെൻസിറ്റിവിറ്റി വൺ-സ്റ്റെപ്പ് പ്രോബ് Rt- എന്നതിനായുള്ള അതിന്റെ വിപണിയുടെ നിർണായക സർട്ടിഫിക്കേഷനുകളിൽ ഭൂരിപക്ഷം നേടുന്നു.ക്യുപിസിആർകിറ്റ് V2, ഗുണനിലവാരം ഫാക്ടറി ജീവിതമാണ്, ഉപഭോക്താവിന്റെ ആവശ്യത്തിൽ ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിക്കുക എന്നതാണ് കമ്പനിയുടെ നിലനിൽപ്പിന്റെയും വികസനത്തിന്റെയും ഉറവിടം, ഞങ്ങൾ സത്യസന്ധതയും നല്ല വിശ്വാസത്തോടെയുള്ള പ്രവർത്തന മനോഭാവവും പാലിക്കുന്നു, നിങ്ങളുടെ വരവിനായി കാത്തിരിക്കുന്നു!
ഞങ്ങൾ പരിചയസമ്പന്നരായ നിർമ്മാതാക്കളാണ്.അതിന്റെ വിപണിയുടെ നിർണായക സർട്ടിഫിക്കേഷനുകളിൽ ഭൂരിപക്ഷം നേടുന്നുചൈന ടാക്ക് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ്, ക്യുപിസിആർ, ഞങ്ങളുടെ കമ്പനി വാഗ്ദാനം ചെയ്യുന്നു: ന്യായമായ വിലകൾ, ചെറിയ ഉൽപ്പാദന സമയം, തൃപ്തികരമായ വിൽപ്പനാനന്തര സേവനം, നിങ്ങൾ ആഗ്രഹിക്കുന്ന ഏത് സമയത്തും ഞങ്ങളുടെ ഫാക്ടറി സന്ദർശിക്കാൻ ഞങ്ങൾ നിങ്ങളെ സ്വാഗതം ചെയ്യുന്നു.ഇപ്പോൾ നമുക്ക് ഒരുമിച്ച് സുഖകരവും ദീർഘകാലവുമായ ഒരു ബിസിനസ്സ് ഉണ്ടാകട്ടെ എന്ന് ആശംസിക്കുന്നു!!!

വിവരണങ്ങൾ

RT-qPCR പ്രതികരണങ്ങൾക്കായി കൾച്ചർഡ് സെൽ സാമ്പിളുകളിൽ നിന്ന് RNA വേഗത്തിൽ പുറത്തുവിടാൻ കഴിയുന്ന ഒരു അദ്വിതീയ ലിസിസ് ബഫർ സിസ്റ്റം ഈ കിറ്റ് ഉപയോഗിക്കുന്നു, അതുവഴി സമയമെടുക്കുന്നതും അധ്വാനിക്കുന്നതുമായ RNA ശുദ്ധീകരണ പ്രക്രിയ ഇല്ലാതാക്കുന്നു.RNA ടെംപ്ലേറ്റ് വെറും 7 മിനിറ്റിനുള്ളിൽ ലഭിക്കും.കിറ്റ് നൽകുന്ന 5×ഡയറക്ട് ആർടി മിക്സും 2×ഡയറക്ട് qPCR മിക്സ്-SYBR റിയാജന്റുകളും തത്സമയ ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് പിസിആർ ഫലങ്ങൾ വേഗത്തിലും ഫലപ്രദമായും ലഭിക്കും.

5×ഡയറക്ട് RT മിക്‌സ്, 2×ഡയറക്ട് qPCR മിക്സ്-SYBR എന്നിവയ്ക്ക് ശക്തമായ ഇൻഹിബിറ്റർ ടോളറൻസ് ഉണ്ട്, കൂടാതെ സാമ്പിളുകളുടെ ലൈസേറ്റ് നേരിട്ട് RT-qPCR-ന്റെ ടെംപ്ലേറ്റായി ഉപയോഗിക്കാം.ഈ കിറ്റിൽ അദ്വിതീയ RNA ഹൈ-അഫിനിറ്റി ഫോർജീൻ റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റേസും Hot D-Taq DNA പോളിമറേസും, dNTPs, MgCl എന്നിവയും അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.₂, പ്രതികരണ ബഫർ, PCR ഒപ്റ്റിമൈസർ, സ്റ്റെബിലൈസർ.

സ്പെസിഫിക്കേഷനുകൾ

200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns

കിറ്റ് ഘടകങ്ങൾ

സവിശേഷതകൾ & നേട്ടങ്ങൾ

■ ലളിതവും ഫലപ്രദവും : സെൽ ഡയറക്ട് ആർടി സാങ്കേതികവിദ്യ ഉപയോഗിച്ച്, ആർഎൻഎ സാമ്പിളുകൾ വെറും 7 മിനിറ്റിനുള്ളിൽ ലഭിക്കും.

■ സാമ്പിൾ ഡിമാൻഡ് ചെറുതാണ്, 10 സെല്ലുകൾ വരെ പരിശോധിക്കാം.

■ ഉയർന്ന ത്രൂപുട്ട്: 384, 96, 24, 12, 6-കിണർ പ്ലേറ്റുകളിൽ സംസ്കരിച്ച കോശങ്ങളിലെ ആർഎൻഎയെ വേഗത്തിൽ കണ്ടെത്താനാകും.

■ ഡിഎൻഎ ഇറേസറിന് റിലീസ് ചെയ്‌ത ജീനോമുകൾ വേഗത്തിൽ നീക്കം ചെയ്യാനും തുടർന്നുള്ള പരീക്ഷണ ഫലങ്ങളിലെ ആഘാതം ഗണ്യമായി കുറയ്ക്കാനും കഴിയും.

■ ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്ത RT, qPCR സിസ്റ്റം രണ്ട്-ഘട്ട RT-PCR റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷനെ കൂടുതൽ കാര്യക്ഷമവും PCR കൂടുതൽ വ്യക്തവും RT-qPCR റിയാക്ഷൻ ഇൻഹിബിറ്ററുകളെ കൂടുതൽ പ്രതിരോധിക്കുന്നതുമാക്കുന്നു.

കിറ്റ് ആപ്ലിക്കേഷൻ

ആപ്ലിക്കേഷന്റെ വ്യാപ്തി: സംസ്ക്കരിച്ച സെല്ലുകൾ.

- സാമ്പിൾ ലിസിസ് മുഖേന RNA പുറത്തിറക്കിയതാണ്: ഈ കിറ്റിന്റെ RT-qPCR ടെംപ്ലേറ്റിന് മാത്രം ബാധകമാണ്.

- കിറ്റ് ഇനിപ്പറയുന്ന ആവശ്യങ്ങൾക്ക് ഉപയോഗിക്കാം: ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ വിശകലനം, siRNA-മെഡിയേറ്റഡ് ജീൻ സൈലൻസിംഗ് ഇഫക്റ്റിന്റെ സ്ഥിരീകരണം, മയക്കുമരുന്ന് സ്ക്രീനിംഗ് മുതലായവ.

ഡയഗ്രം

സംഭരണവും ഷെൽഫ് ജീവിതവും

ഈ കിറ്റിന്റെ ഭാഗം I 4 ഡിഗ്രിയിൽ സൂക്ഷിക്കണം;ഭാഗം II -20 ഡിഗ്രിയിൽ സൂക്ഷിക്കണം.

Foregene Protease Plus II 4℃-ൽ സൂക്ഷിക്കണം, -20℃-ൽ ഫ്രീസ് ചെയ്യരുത്.

റീജന്റ് 2×ഡയറക്ട് qPCR മിക്സ്-SYBR -20℃-ൽ ഇരുട്ടിൽ സൂക്ഷിക്കണം;ഇടയ്ക്കിടെ ഉപയോഗിക്കുകയാണെങ്കിൽ, ഹ്രസ്വകാല സംഭരണത്തിനായി ഇത് 4℃-ൽ സംഭരിക്കാനും കഴിയും (10 ദിവസത്തിനുള്ളിൽ ഉപയോഗിക്കുക). ഞങ്ങൾ പരിചയസമ്പന്നരായ നിർമ്മാതാക്കളാണ്.Wining the majority in the crucial certifications of its market for Big discounting China High sensitivity One-Step Probe Rt-Qpcr Kit V2, ഗുണനിലവാരം ഫാക്ടറി 'ജീവിതമാണ് , ഉപഭോക്താവിന്റെ ഡിമാൻഡിൽ ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിക്കുക കമ്പനി അതിജീവനത്തിന്റെയും വികസനത്തിന്റെയും ഉറവിടം, We adhere to honesty and good faith working attitude, looking forward to your coming!
വലിയ കിഴിവ്ചൈന ടാക്ക് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ്, Qpcr, ഞങ്ങളുടെ കമ്പനി വാഗ്ദാനം ചെയ്യുന്നു: ന്യായമായ വിലകൾ, ചെറിയ ഉൽപ്പാദന സമയം, തൃപ്തികരമായ വിൽപ്പനാനന്തര സേവനം, നിങ്ങൾ ആഗ്രഹിക്കുന്ന ഏത് സമയത്തും ഞങ്ങളുടെ ഫാക്ടറി സന്ദർശിക്കാൻ ഞങ്ങൾ നിങ്ങളെ സ്വാഗതം ചെയ്യുന്നു.ഇപ്പോൾ നമുക്ക് ഒരുമിച്ച് സുഖകരവും ദീർഘകാലവുമായ ഒരു ബിസിനസ്സ് ഉണ്ടാകട്ടെ എന്ന് ആശംസിക്കുന്നു!!!

QuickEഅസിTM Cell Direct RT-qപി.സി.ആർ Kit -തക്മ്an

Cat.No.DRT-01021/01022

സെൽ ഡയറക്റ്റ് RT-qPCR-ന് ≤ 1000,000 സെല്ലുകൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു

ഉൽപ്പന്നം പരിചയപ്പെടുത്തൽ

RT-qPCR പ്രതികരണങ്ങൾക്കായി കൾച്ചർഡ് സെൽ സാമ്പിളുകളിൽ നിന്ന് RNA വേഗത്തിൽ പുറത്തുവിടാൻ ഈ ഉൽപ്പന്നം ഒരു അദ്വിതീയ ലിസിസ് ബഫർ സിസ്റ്റം ഉപയോഗിക്കുന്നു, സമയമെടുക്കുന്നതും അധ്വാനിക്കുന്നതുമായ RNA ശുദ്ധീകരണ പ്രക്രിയ ഇല്ലാതാക്കുന്നു, കൂടാതെ ആവശ്യമായ RNA ടെംപ്ലേറ്റ് ലഭിക്കാൻ 7 മിനിറ്റ് മാത്രം മതി, 5× ഡയറക്‌റ്റ് RT മിക്‌സ്, 2× ഡയറക്‌റ്റ് qPCR മിക്സ്-ടക്മാൻ-ടൈം-ടക്‌മൻ ഫലപ്രാപ്തിയനുസരിച്ച് വേഗത്തിൽ ലഭിക്കും.

5× ഡയറക്ട് ആർടി മിക്സും 2× ഡയറക്ട് qPCR മിക്സ്-തക്മാനും ശക്തമായ ഇൻഹിബിറ്റർ ടോളറൻസുണ്ട്, കൂടാതെ ഒരു ടെംപ്ലേറ്റായി അളക്കേണ്ട സാമ്പിളിന്റെ ലൈസേറ്റ് ഉപയോഗിച്ച് കാര്യക്ഷമമായ റിവേഴ്സലും നിർദ്ദിഷ്ട ആംപ്ലിഫിക്കേഷനും നടത്താൻ കഴിയും.റിയാജന്റിൽ ഫോർജീൻ റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റേസ്, ഹോട്ട് ഡി-ടാക് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ്, ഡിഎൻടിപികൾ, എംജിസിഎൽ എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.₂, റിയാക്ഷൻ ബഫർ, പിസിആർ ഒപ്റ്റിമൈസർ, സ്റ്റെബിലൈസർ, സാമ്പിളുകൾ വേഗത്തിലും എളുപ്പത്തിലും കണ്ടെത്തുന്നതിന് ലിസിസ് ബഫറിനൊപ്പം ഉപയോഗിക്കാവുന്നതും ഉയർന്ന സെൻസിറ്റിവിറ്റി, പ്രത്യേകത, സ്ഥിരത എന്നിവയുടെ സവിശേഷതകളും ഉണ്ട്.

ഉൽപ്പന്ന സവിശേഷതകൾ

ആർ‌എൻ‌എ സാമ്പിളുകൾ ലഭിക്കാൻ 7 മിനിറ്റ് വരെ എടുക്കുന്ന ലളിതവും ഫലപ്രദവുമായ സെൽ ഡയറക്‌ട് ആർ‌ടി സാങ്കേതികവിദ്യ.

സാമ്പിൾ ആവശ്യകതകൾ ചെറുതാണ്, കൂടാതെ കുറഞ്ഞത് 10 സംസ്ക്കരിച്ച സെല്ലുകളെങ്കിലും പരീക്ഷണത്തിനായി ഉപയോഗിക്കാം.

384, 96, 24, 12, 6-കിണർ പ്ലേറ്റുകൾ പോലെയുള്ള സംസ്ക്കരിച്ച കോശങ്ങൾ ദ്രുതഗതിയിലുള്ള ആർഎൻഎ ഏറ്റെടുക്കുന്നതിനുള്ള ഉയർന്ന ത്രൂപുട്ട്.

ഡിഎൻഎ ഇറേസറിന് റിലീസ് ചെയ്ത ജീനോമുകൾ വേഗത്തിൽ നീക്കംചെയ്യാൻ കഴിയും, ഇത് തുടർന്നുള്ള പരീക്ഷണ ഫലങ്ങളിലെ ആഘാതം ഗണ്യമായി കുറയ്ക്കുന്നു.

ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്ത RT, qPCR സംവിധാനങ്ങൾ കൂടുതൽ കാര്യക്ഷമമായ റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ, പ്രത്യേകത, ശക്തമായ RT-qPCR റിയാക്ഷൻ ഇൻഹിബിറ്റർ ടോളറൻസ് എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് രണ്ട്-ഘട്ട RT-PCR പ്രവർത്തനക്ഷമമാക്കുന്നു.

കിറ്റ് ആപ്ലിക്കേഷൻ

ആപ്ലിക്കേഷന്റെ വ്യാപ്തി: സംസ്ക്കരിച്ച സെല്ലുകൾ.

സാമ്പിൾ ലിസിസ് വ്യാഖ്യാനിച്ച RNA: രണ്ട്-ഘട്ട RT-qPCR ടെംപ്ലേറ്റായി മാത്രം ഉപയോഗിക്കുന്നു.

കിറ്റുകൾ ഇനിപ്പറയുന്ന ആവശ്യങ്ങൾക്കായി ഉപയോഗിക്കാം: ജീൻ റെഗുലേറ്ററി എക്സ്പ്രഷൻ വിശകലനം, അല്ലീൽ പരിശോധന, മയക്കുമരുന്ന് സ്ക്രീനിംഗ് മുതലായവ.

കിറ്റ് പരിമിതികൾ

ആംപ്ലിഫൈഡ് ശകലങ്ങൾ ≤ 300 bp.

സെല്ലുകളെ പുതുതായി സംസ്കരിക്കാൻ കിറ്റുകൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു.

ഉൽപ്പന്ന ഗുണനിലവാര നിയന്ത്രണം

FOREGENE-ന്റെ ടോട്ടൽ ക്വാളിറ്റി മാനേജ്‌മെന്റ് സിസ്റ്റം അനുസരിച്ച്, ഓരോ ബാച്ച് കിറ്റുകളുടെയും ഗുണനിലവാരത്തിന്റെ വിശ്വാസ്യതയും സ്ഥിരതയും ഉറപ്പാക്കാൻ സെൽ ഡയറക്‌ട് RT-qPCR സീരീസ് കിറ്റുകളുടെ ഓരോ ബാച്ചും ഒന്നിലധികം തവണ കർശനമായി പരിശോധിക്കുന്നു.

കിറ്റ് ഉള്ളടക്കങ്ങൾ

*:സെൽ ലിസിസ്, 5×ഡയറക്ട് ആർടി മിക്സ്, 2× ഡയറക്ട് qPCR മിക്സ്-തഖ്മാൻ പ്രത്യേകം വാങ്ങാം, വിശദാംശങ്ങൾ അനുബന്ധം 1-ൽ നൽകിയിരിക്കുന്നു (പേജ് 13).

സംഭരണ ​​വ്യവസ്ഥകൾ

1. ഷിപ്പിംഗ് വ്യവസ്ഥകൾ

കിറ്റ് <4 °C നിലയിലാണെന്ന് ഉറപ്പാക്കാൻ, കുറഞ്ഞ താപനിലയുള്ള ഐസ് പായ്ക്ക് ബോക്സ് ഗതാഗതത്തിന്റെ മുഴുവൻ പ്രക്രിയയും.

2. സംഭരണ ​​വ്യവസ്ഥകൾ

ഭാഗം I 4 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിലും രണ്ടാം ഭാഗം -20 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിലും സംഭരിക്കുക.

ഫോർജീൻ പ്രോട്ടീസ് പ്ലസ് II 4 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ സൂക്ഷിക്കണം, -20 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ ഫ്രീസുചെയ്യരുത്.

റീജന്റ് 2× ഡയറക്ട് qPCR Mix-Taqman -20°C, അല്ലെങ്കിൽ ഇടയ്ക്കിടെ ഉപയോഗിക്കുകയാണെങ്കിൽ (10 ദിവസത്തിനുള്ളിൽ) ഹ്രസ്വകാല ഉപയോഗത്തിനായി 4°C-ൽ സൂക്ഷിക്കുന്നു.

കിറ്റ് ഘടക വിവരങ്ങൾ

ബഫർ CL: സെൽ ലിസിസ് പ്രതികരണങ്ങൾക്ക് ആവശ്യമായ അന്തരീക്ഷം നൽകുന്നു.

ബഫർ എസ്ടി: തുടർന്നുള്ള ആർടിയിൽ ഇഫക്റ്റുകൾ ഒഴിവാക്കാൻ ലൈസേറ്റിലെ സജീവ പദാർത്ഥത്തെ അവസാനിപ്പിക്കുന്നു.

ഡിഎൻഎ ഇറേസർ: ഡിഎൻഎ റിമൂവർ, തുടർന്നുള്ള പരീക്ഷണങ്ങളിൽ ജീനോം നീക്കം ചെയ്യുന്നതിന്റെ പ്രഭാവം.

5× ഡയറക്ട് ആർടി മിക്സ്: ഉയർന്ന ആർഎൻഎ അഫിനിറ്റി ഫോർജീൻ റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റേസ്, ആർഎൻഎസ് ഇൻഹിബിറ്റർ, ഡിഎൻടിപികൾ, സ്റ്റെബിലൈസറുകൾ, എൻഹാൻസറുകൾ, ഒപ്റ്റിമൈസറുകൾ, ഒപ്റ്റിമൽ അലൈൻമെന്റിനായി റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ പ്രൈമറുകൾ എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു (റാൻഡം പ്രൈമർ, ഒലിഗോ(ഡിടി)₁₈പ്രൈമർ).

ഫോർജീൻ പ്രോട്ടീസ് പ്ലസ് II: ലിസിസ് ബഫറിന്റെ പശ്ചാത്തലത്തിൽ, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകൾ പുറത്തുവിടാൻ കോശങ്ങൾ ലൈസ് ചെയ്യപ്പെടുന്നു.

2× ഡയറക്ട് qPCR മിക്സ്-തഖ്മാൻ: ഈ റിയാജന്റിൽ ഹോട്ട് ഡി-ടാക്ക് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ്, ഡിഎൻടിപികൾ, എംജിസിഎൽ എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.₂, പ്രതികരണ ബഫർ, PCR ഒപ്റ്റിമൈസർ, സ്റ്റെബിലൈസർ.

20× ROX റഫറൻസ് ഡൈ: എബിഐ, സ്ട്രാറ്റജീൻ, മറ്റ് കമ്പനികൾ എന്നിവയുടെ റിയൽ ടൈം പിസിആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഉപകരണങ്ങളിൽ സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു, പിസിആർ ട്യൂബുകളും പിസിആർ ഡോസിംഗ് പിശകുകൾ മൂലമുണ്ടാകുന്ന ട്യൂബുകളും തമ്മിലുള്ള വ്യത്യാസം ക്രമീകരിക്കാൻ ഇത് ഉപയോഗിക്കുന്നു.വ്യത്യസ്‌ത ഉപകരണങ്ങൾക്ക് ആവശ്യമായ 20× ROX റഫറൻസ് ഡൈ കോൺസൺട്രേഷൻ വ്യത്യസ്‌തമാണ്, കൂടാതെ ഉപകരണത്തിന്റെ ശുപാർശ ചെയ്‌ത ഏകാഗ്രത അനുസരിച്ച് ഉപയോക്താവിന് ഇത് ചേർക്കാനാകും.

RNase-Free ddH₂O: രണ്ട്-ഘട്ട RT-qPCR പ്രതികരണങ്ങൾക്കായി RNase-രഹിത അണുവിമുക്തമാക്കിയ അൾട്രാ ശുദ്ധജലം.

മുൻകരുതലുകൾ:(കിറ്റ് ഉപയോഗിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് മുൻകരുതലുകൾ ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം വായിക്കുന്നത് ഉറപ്പാക്കുക)

സാമ്പിളുകൾക്കിടയിൽ ക്രോസ്-മലിനീകരണം ഒഴിവാക്കാൻ പരീക്ഷണത്തിന്റെ പ്രവർത്തന രീതി ശ്രദ്ധിക്കുക.

RNase മലിനീകരണവും RNA അപചയവും ഒഴിവാക്കാൻ പരീക്ഷണാത്മക ചുറ്റുപാടുകളുടെയും പാത്രങ്ങളുടെയും ശുചിത്വം ശ്രദ്ധിക്കുക.

പുതിയതോ നന്നായി സംരക്ഷിച്ചതോ ആയ സെൽ സാമ്പിളുകൾ എടുക്കുക, ആവർത്തിച്ചുള്ള ഫ്രീസ്-തൗഡ് സെൽ സാമ്പിളുകൾ ഒരിക്കലും ഉപയോഗിക്കരുത്.

5× ഡയറക്ട് qPCR മിക്സ്,2× ഡയറക്ട് qPCR മിക്സ്-തഖ്മാൻ ആവർത്തിച്ചുള്ള ഫ്രീസ്-ഥോ ഒഴിവാക്കണം, അല്ലാത്തപക്ഷം ഇത് റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷനെയും PCR കാര്യക്ഷമതയെയും ബാധിക്കും.

തയ്യാറാക്കുകറേഷൻമുമ്പ്ഓപ്പറേഷൻ

ഈ കിറ്റ് ഉപയോഗിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് നിർദ്ദേശങ്ങൾ ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം വായിക്കുന്നത് ഉറപ്പാക്കുക.സെൽ ഡയറക്റ്റ് RT-qPCR കിറ്റ് ലളിതവും സൗകര്യപ്രദവും വേഗത്തിലുള്ള പ്രവർത്തനവുമാണ്, കൂടാതെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ മുഴുവൻ കിറ്റിനെ കുറിച്ചും അത് എങ്ങനെ ശരിയായി ഉപയോഗിക്കാമെന്നതിനെ കുറിച്ചുമുള്ള പൂർണ്ണമായ വിവരങ്ങൾ നൽകുന്നു.ഉപയോഗിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് ആവശ്യമായ പരീക്ഷണ സാമഗ്രികളും ഉപകരണങ്ങളും തയ്യാറാക്കുക.

പരീക്ഷണ സാമഗ്രികളും ഉപകരണങ്ങളും

◆ സാംസ്കാരിക കോശങ്ങൾ.

◆ 1.5 മില്ലി അല്ലെങ്കിൽ 2 മില്ലി, RNase-/DNase-ഫ്രീ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബ്, RNase-/DNase-ഫ്രീ ടിപ്പ്, 0.2 മില്ലി അണുവിമുക്തമായ qPCR ട്യൂബ്.

◆ qPCR മെഷീൻ, പൈപ്പറ്റ്, ടേബിൾടോപ്പ് സെൻട്രിഫ്യൂജ് (≥13,400×g) (പരീക്ഷണ ആവശ്യങ്ങളെ ആശ്രയിച്ച്), മുതലായവ.

സുരക്ഷ

◆ ഈ ഉൽപ്പന്നം ശാസ്ത്രീയ ഗവേഷണ ആവശ്യങ്ങൾക്ക് മാത്രമുള്ളതാണ്, ദയവായി ഇത് ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ, ക്ലിനിക്കൽ, ഭക്ഷണം, സൗന്ദര്യവർദ്ധക ആവശ്യങ്ങൾക്കായി ഉപയോഗിക്കരുത്.

◆ രാസവസ്തുക്കൾ ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ, ഉചിതമായ ലാബ് വസ്ത്രങ്ങൾ, കയ്യുറകൾ, സംരക്ഷണ ഗ്ലാസുകൾ മുതലായവ ധരിക്കുക.

ഓപ്പറേഷൻവഴികാട്ടികൾ

സെൽ ലിസിസ് സിസ്റ്റങ്ങൾ, RT സിസ്റ്റങ്ങൾ, qPCR റിയാക്ഷൻ സൊല്യൂഷൻ സപ്ലിമെന്റ് പായ്ക്കുകൾ എന്നിവ അനുബന്ധം 1-ലെ വിശദാംശങ്ങൾക്കായി പ്രത്യേകം വാങ്ങാവുന്നതാണ് (പേജ് 13).

ഓപ്പറേഷൻ ഗൈഡ്

A: സാമ്പിൾ RNA റിലീസ്

1.കോശങ്ങൾ മുൻകൂട്ടി ചികിത്സിച്ചു: തണുത്ത പിബിഎസ് ഉപയോഗിച്ച് സെൽ കൾച്ചർ പ്ലേറ്റ് കഴുകുക, തുടർന്ന് കോശങ്ങൾ ലൈസ് ചെയ്യുക (10-10⁶), 10⁶ കോശങ്ങളുടെ അളവിനേക്കാൾ, ആർഎൻഎ വേർതിരിച്ചെടുക്കുന്നതിനും ശുദ്ധീകരിക്കുന്നതിനുമായി ഫോർജെൻ ദി സെൽ ഒരു ആർഎൻഎ ഐസൊലേഷൻ കിറ്റ് ടോട്ടൽ (ഡിഇ-03111) അല്ലെങ്കിൽ അനിമൽ ടോട്ടൽ ആർഎൻഎ ഐസൊലേഷൻ കിറ്റ് (ഡിഇ-03011) ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.

1.1അനുബന്ധ കോശങ്ങൾ (24- കിണർ പ്ലേറ്റ് ഉദാഹരണം)

1.1.1.ഓരോ കിണറിലെയും സെല്ലുകളുടെ എണ്ണം നിർണ്ണയിക്കുക, സെല്ലുകളുടെ എണ്ണം 1 × 10 ആണെന്ന് നിർണ്ണയിക്കുക⁵, കൾച്ചർ ഡിഷിൽ നിന്ന് കൾച്ചർ മീഡിയം നീക്കം ചെയ്യാൻ ഒരു പൈപ്പറ്റ് ഉപയോഗിക്കുക.

1.1.2.ഓരോ കിണറിലേക്കും 200 μl പ്രീ-ശീതീകരിച്ച 1 × PBS ചേർക്കുക.ആവർത്തിച്ച് പൈപ്പ് ചെയ്യരുത്, കിണറുകളിൽ നിന്ന് പിബിഎസ് നീക്കം ചെയ്യുക.പ്ലേറ്റ് ചരിഞ്ഞ് കഴിയുന്നത്ര പിബിഎസ് നീക്കം ചെയ്യുക.ഘട്ടം 2-ലേക്ക് പോകുക.

1.1.3.ഒരു സെൽ കൾച്ചർ ഡിഷിൽ വ്യത്യസ്‌ത സെൽ കൾച്ചർ ഡിഷ് അല്ലെങ്കിൽ ഒരു റഫറൻസ് നമ്പർ ടേബിൾ 1-1 സെൽ വാഷിംഗിനായി 1 × പിബിഎസ് പ്രീ കൂൾഡ് ചേർത്തു.

പട്ടിക 1-1: വ്യത്യസ്ത എണ്ണം സെല്ലുകൾക്കുള്ള PBS ഡോസ്

കുറിപ്പ്：ഉറച്ച ചേരുന്ന കോശങ്ങൾ ഉറപ്പാക്കാൻ,കഴുകുമ്പോൾ ഒരു വലിയ സംഖ്യ സെൽ നഷ്ടം ഒഴിവാക്കി.

1.2സുഷിരങ്ങളില്ലാത്ത പ്ലേറ്റുകളിൽ സംസ്കരിച്ച സസ്പെൻഷൻ സെല്ലുകൾ അല്ലെങ്കിൽ അഡ്ഡറന്റ് സെല്ലുകൾ

1.2.1.നോൺ-മൾട്ടി വെൽ പ്ലേറ്റുകളിൽ സംസ്കരിച്ച അഡ്ഡറന്റ് സെല്ലുകൾ (അടുത്ത ഘട്ടം 1.2.2 മുതൽ സസ്പെൻഷൻ സെല്ലുകൾ ആരംഭിക്കുന്നു), സാധാരണ സെൽ ശേഖരണ രീതി അനുസരിച്ച് സെല്ലുകൾ ശേഖരിച്ച് വേർതിരിക്കുക, അവയെ ഒരു കൾച്ചർ പ്ലേറ്റിലോ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബിലോ സ്ഥാപിക്കുക;ട്രൈപ്സിനൈസേഷൻ ഉപയോഗിക്കുകയാണെങ്കിൽ, കോശങ്ങൾ ശേഖരിക്കുന്നതിനും അവശിഷ്ട ട്രൈപ്സിൻ നീക്കം ചെയ്യുന്നതിനും അപകേന്ദ്രീകരണം ആവശ്യമാണ്, കോശങ്ങളെ ചിതറിക്കാൻ PBS പുനഃസ്ഥാപിച്ച സെല്ലുകൾ വ്യക്തിഗത സെല്ലുകളിലേക്ക് ചേർത്തു.

1.2.2.എണ്ണപ്പെട്ട സെല്ലുകളുടെ എണ്ണം കഴിഞ്ഞാൽ, അലിക്യൂട്ട് ചെയ്ത സെല്ലുകൾ 1×10⁵ ഒന്ന് മുതൽ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബുകൾ വരെ, 10 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് 1000 × ഗ്രാം സെന്റീഫ്യൂഗേഷൻ വഴി സെല്ലുകൾ ശേഖരിക്കുക.

1.2.3.സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബിലേക്ക് 200 μl PBS ചേർക്കുക, ആവർത്തിച്ച് പൈപ്പ് ചെയ്യരുത്, PBS നേരിട്ട് ആസ്പിറേറ്റ് ചെയ്യുക.ഘട്ടം 2-ലേക്ക് പോകുക. (അവഴിപ്പിക്കാൻ പ്രയാസമാണെങ്കിൽ, കോശങ്ങൾ വീണ്ടും പുനഃസ്ഥാപിക്കുകയാണെങ്കിൽ, സൂപ്പർനാറ്റന്റ് ഉപേക്ഷിച്ച് 10 മിനിറ്റിന് ശേഷം 1000×g സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്തേക്കാം, സെൽ പെല്ലറ്റ് ഘട്ടം 2-ലേക്ക് പോകും)

2.സെൽ ലിസിസ്: ബഫർ CL നീക്കം ചെയ്യുക, അതിന്റെ ഊഷ്മാവ്, ഡിഎൻഎ ഇറേസർ, ഫോർജീൻ പ്രോട്ടീസ് പ്ലസ് II എന്നിവയ്ക്ക് തുല്യമാണ്, ഇനിപ്പറയുന്ന പട്ടിക 1-2 തയ്യാറാക്കിയ ലിസിസ് സിസ്റ്റം അനുസരിച്ച്: (ലൈസിസ് ലായനി ഉപയോഗത്തിന് തയ്യാറാണ്).

പട്ടിക1-2: പിളർപ്പ് സിസ്റ്റം തയ്യാറാക്കൽ (ശ്രദ്ധിക്കുക: ഐസിൽ തയ്യാറാക്കുന്നതിൽ)

3.( 24 -കിണർ പ്ലേറ്റ് ഉദാഹരണമായി ) പൈപ്പറ്റ് 200 μl സെൽ ലിസിസ് മാസ്റ്റർ ഓരോ കിണറിലേക്കും കലർത്തുക, 5-10 തവണ ആവർത്തിച്ച് ഊതുക, 5 മിനിറ്റ് ഊഷ്മാവിൽ (20-25 ℃) ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുക.

കുറിപ്പ്：കുമിളകൾ ഉണ്ടാകുന്നത് ഒഴിവാക്കാൻ, പൈപ്പറ്റ് സ്കെയിൽ 200μl അല്ലെങ്കിൽ അതിൽ കുറവായി ക്രമീകരിച്ചു.ലിസിസിന് ശേഷം കോശങ്ങൾ മേഘാവൃതമായി കാണപ്പെടാം, ഇത് സാധാരണമാണ്.

4.(24-ഉദാഹരണമായി നന്നായി പ്ലേറ്റ്) 20 μl ബഫർ ST ദ്രാവകത്തിൽ ചേർത്തു (പട്ടിക 1-3-ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്ന തുകയിൽ ബഫർ ST ചേർക്കുന്ന വ്യത്യസ്ത ലിസിസ് സിസ്റ്റങ്ങൾ), 5-10 തവണ ആവർത്തിച്ചുള്ള പൈപ്പറ്റിംഗ്, റൂം താപനിലയിൽ (20-25 ℃) 2 മിനിറ്റ് ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു.

കുറിപ്പ്：പൈപ്പറ്റ് ടിപ്പ് ഉപരിതലത്തിന് താഴെയായി നീക്കം ചെയ്തു, ലൈസേറ്റ് ചേർത്തിട്ടുണ്ടെന്ന് ഉറപ്പാക്കുന്നു,കുമിളകൾ ഉണ്ടാകുന്നത് ഒഴിവാക്കാൻ, പൈപ്പറ്റ് സ്കെയിൽ 200μl അല്ലെങ്കിൽ അതിൽ കുറവായി ക്രമീകരിച്ചു.

പട്ടിക 1-3：ബഫർ ST ചേർക്കുക

5. തുടർന്നുള്ള RT-qPCR പരീക്ഷണങ്ങൾക്ക് ലൈസേറ്റ് ഉപയോഗിക്കുന്നു.തുടർന്നുള്ള പരീക്ഷണങ്ങൾ കൃത്യസമയത്ത് നടത്താൻ കഴിയുന്നില്ലെങ്കിൽ, ദയവായി 2 മണിക്കൂറിൽ കൂടുതൽ ഐസിൽ സൂക്ഷിക്കുക, കൂടാതെ -20℃ അല്ലെങ്കിൽ -80 ℃ (മൂന്ന് മാസത്തിൽ കൂടരുത്) സൂക്ഷിക്കുക.

ബി: ആർടി സിസ്റ്റം തയ്യാറാക്കൽ

1. 5 × ഡയറക്ട് ആർടി മിക്സ് എടുത്ത് ഒരു ഐസ് ബാത്തിൽ വയ്ക്കുക, അത് സ്വാഭാവികമായി ഉരുകാൻ അനുവദിക്കുക, പിന്നീടുള്ള ഉപയോഗത്തിനായി പതുക്കെ ഇളക്കുക;RNase-Free ddH2O എടുത്ത് ഉരുക്കി പിന്നീട് ഉപയോഗത്തിനായി ഒരു ഐസ് ബാത്തിൽ വയ്ക്കുക.ചുവടെയുള്ള പട്ടിക 2-1 അനുസരിച്ച് ഹിമത്തിൽ പ്രതികരണ സംവിധാനം തയ്യാറാക്കുക.

പട്ടിക 2-1: RT പ്രതികരണ സംവിധാനം തയ്യാറാക്കൽ

2.സിസ്റ്റം ഫോർമുലേഷൻ പൂർത്തിയാക്കിയ ശേഷം, താഴെയുള്ള പട്ടിക 2 -2 പ്രതികരണ വ്യവസ്ഥകളിൽ സൌമ്യമായി മിക്സഡ് ചെയ്ത് സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യുക.

പട്ടിക 2-2: RT പ്രതികരണ വ്യവസ്ഥ ക്രമീകരണം

3. പ്രതികരണം പൂർത്തിയാക്കിയ ശേഷം, പ്രതികരണ ഉൽപ്പന്നം qPCR നായി നേരിട്ട് ഐസിൽ സ്ഥാപിച്ചു, ദയവായി ദീർഘകാല സംരക്ഷണം -20℃ അല്ലെങ്കിൽ -80 ℃ ഇടുക.

ശ്രദ്ധിക്കുക: ശുദ്ധീകരിക്കാത്ത ടെംപ്ലേറ്റിന്റെ ഉപയോഗം കാരണം, റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഉൽപ്പന്നത്തിൽ വെളുത്ത അവശിഷ്ടങ്ങൾ പ്രത്യക്ഷപ്പെടാം.ഇതൊരു സാധാരണ പ്രതിഭാസമാണ്.തുടർന്നുള്ള പരീക്ഷണങ്ങൾക്കായി സൂപ്പർനാറ്റന്റ് ഉടനടി സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യുക.

തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന RT പ്രതികരണ പരിഹാരം അടുത്ത ഘട്ടം റിയൽ ടൈം PCR പ്രതികരണ സംവിധാനങ്ങളിലേക്ക് ചേർക്കുന്നു, പ്രതികരണ സംവിധാനത്തിന്റെ 10-30% വരെയുള്ള തുകകൾ ചേർക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.

സി: qPCR പ്രതികരണ സംവിധാനം തയ്യാറാക്കൽ

1. ഒരു പ്രതികരണ സംവിധാനം തയ്യാറാക്കുന്നതിനായി താഴെ കൊടുത്തിരിക്കുന്ന പട്ടിക 3-1 അനുസരിച്ച് ഘട്ടം cDNA ടെംപ്ലേറ്റിൽ തയ്യാറാക്കിയ B യുടെ ഉചിതമായ തുക.

ശ്രദ്ധിക്കുക: cDNA ടെംപ്ലേറ്റിന്റെ അളവ് qPCR സിസ്റ്റത്തിന്റെ 10-30% വരും.ഉദാഹരണത്തിന്, 20μl qPCR സിസ്റ്റത്തിൽ, 2-6 μl ലിസിസ് ബഫർ ചേർക്കുക, എന്നാൽ 6 μl-ൽ കൂടരുത്.

2. qPCR പ്രതികരണത്തിനുള്ള ഒപ്റ്റിമൈസേഷൻ നല്ല qPCR അവസ്ഥകൾ (അനിയലിംഗ് താപനില ， മുതലായവ) (പട്ടിക 3-2 ൽ നൽകിയിരിക്കുന്ന പ്രതികരണ വ്യവസ്ഥകൾ).

ശ്രദ്ധിക്കുക: മികച്ച ഫലങ്ങൾ ലഭിക്കുന്നതിന് qPCR പ്രതികരണങ്ങൾക്കായി ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്ത വ്യവസ്ഥകൾ ഉപയോഗിക്കാൻ ശ്രമിക്കുക.

പട്ടിക 3-1: PCR പ്രതികരണ സംവിധാനം തയ്യാറാക്കൽ

1*: പ്രൈമർ പ്രതികരണ പ്രകടനം മോശമാകുമ്പോൾ പ്രൈമർ കോൺസൺട്രേഷൻ 50-900 nM പരിധിയിൽ ക്രമീകരിക്കാം.

ശ്രദ്ധിക്കുക: പരീക്ഷണാത്മക ആവശ്യങ്ങൾക്കും ഫ്ലൂറസെൻസ് സൈക്ലർ മോഡലിനും അനുസരിച്ച് qPCR സിസ്റ്റം ക്രമീകരിക്കാവുന്നതാണ്.50-ൽ qPCR-ന്μl സിസ്റ്റം, 20 അനുസരിച്ച് റീജന്റ് ഡോസ് ആനുപാതികമായി ക്രമീകരിക്കുകμl സിസ്റ്റം.

2*: ഫ്ലൂറസെൻസ് ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് തെർമൽ സൈക്ലർ അനുസരിച്ച് ROX റഫറൻസ് ഡൈയുടെ ഉചിതമായ അന്തിമ സാന്ദ്രത തിരഞ്ഞെടുക്കുക.സാധാരണ ഫ്ലൂറസെൻസ് ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് സൈക്കിളറുകൾക്ക് ഏറ്റവും അനുയോജ്യമായ ROX റഫറൻസ് ഡൈ കോൺസൺട്രേഷനുകൾ ചുവടെയുള്ള പട്ടികയിൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു:

പട്ടിക 3-2: qPCR പ്രതികരണ വ്യവസ്ഥകൾ നൽകിയിരിക്കുന്നു

ശ്രദ്ധിക്കുക: മികച്ച qPCR പ്രഭാവം ലഭിക്കുന്നതിന്, വ്യത്യസ്ത ടെംപ്ലേറ്റുകൾക്കും വ്യത്യസ്ത പ്രൈമറുകൾക്കുമുള്ള പ്രതികരണ സാഹചര്യങ്ങൾ ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്യാൻ ഗ്രേഡിയന്റ് PCR ഉപയോഗിക്കാം.ഫ്ലൂറസെൻസ് അനലൈസർ, ടെംപ്ലേറ്റ്, പ്രൈമർ മുതലായവയെ ആശ്രയിച്ച് PCR പ്രതികരണ അവസ്ഥകൾ വ്യത്യാസപ്പെടുന്നു. നിർദ്ദിഷ്ട പ്രവർത്തനത്തിൽ, ഫ്ലൂറസെൻസ് ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് തെർമൽ സൈക്ലറിന്റെ നിർദ്ദിഷ്ട വ്യവസ്ഥകൾ, ടെംപ്ലേറ്റ് തരം, താൽപ്പര്യത്തിന്റെ ശകലത്തിന്റെ വലുപ്പം, ആംപ്ലിഫൈഡ് ശകലത്തിന്റെ അടിസ്ഥാന ക്രമം, GC പ്രതികരണത്തിന്റെ ദൈർഘ്യം, ഉള്ളടക്കം, പ്രൈമറുകൾ, സമയം, പ്രൈമറുകളുടെ ദൈർഘ്യം മുതലായവ.

റിയൽ ടൈം PCR പ്രൈമർ ഡിസൈൻ തത്വങ്ങൾ

ഫോർവേഡ് പ്രൈമറും റിവേഴ്സ് പ്രൈമറും

റിയൽ ടൈം പിസിആറിന്, പ്രൈമർ ഡിസൈൻ വളരെ പ്രധാനമാണ്.പ്രൈമറുകൾ പിസിആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷന്റെ പ്രത്യേകതയും കാര്യക്ഷമതയുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, കൂടാതെ ഇനിപ്പറയുന്ന തത്വങ്ങളെ പരാമർശിച്ച് രൂപകൽപ്പന ചെയ്യാൻ കഴിയും:

◆ പ്രൈമർ നീളം: 18-30bp.

◆ GC ഉള്ളടക്കം: 40-60%.

◆ Tm മൂല്യം: പ്രൈമർ 5 പോലുള്ള പ്രൈമർ ഡിസൈൻ സോഫ്‌റ്റ്‌വെയറുകൾക്ക് പ്രൈമറിന്റെ Tm മൂല്യം നൽകാൻ കഴിയും.അപ്‌സ്ട്രീം, ഡൗൺസ്ട്രീം പ്രൈമറുകളുടെ Tm മൂല്യങ്ങൾ കഴിയുന്നത്ര അടുത്തായിരിക്കണം.Tm കണക്കുകൂട്ടൽ ഫോർമുലയും ഉപയോഗിക്കാം: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).പിസിആർ നടത്തുമ്പോൾ, പ്രൈമർ ടിഎം മൂല്യമായ 5 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിനു താഴെയുള്ള താപനിലയാണ് സാധാരണയായി അനീലിംഗ് താപനിലയായി തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നത് (അനീലിംഗ് താപനിലയിലെ അനുബന്ധ വർദ്ധനവ് പിസിആർ പ്രതികരണത്തിന്റെ പ്രത്യേകത വർദ്ധിപ്പിക്കും).

◆ പ്രൈമറുകളും PCR ഉൽപ്പന്നങ്ങളും:

◆ ഡിസൈൻ പ്രൈമർ PCR ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഉൽപ്പന്ന ദൈർഘ്യം 100-150bp ആണ്.

◆ ടെംപ്ലേറ്റിന്റെ സെക്കണ്ടറി സ്ട്രക്ചറൽ ഏരിയയിൽ ഡിസൈൻ പ്രൈമറുകൾ കഴിയുന്നത്ര ഒഴിവാക്കണം.

◆ അപ്‌സ്ട്രീം, ഡൗൺസ്ട്രീം പ്രൈമറുകളുടെ 3′ അറ്റങ്ങൾക്കിടയിൽ രണ്ടോ അതിലധികമോ കോംപ്ലിമെന്ററി ബേസുകൾ ഉണ്ടാകുന്നത് ഒഴിവാക്കുക.

◆ പ്രൈമർ 3′ ടെർമിനൽ ബേസ് തുടർച്ചയായി 3 അധിക G അല്ലെങ്കിൽ C എന്നിവയ്‌ക്കൊപ്പം ഉണ്ടാകരുത്.

◆ പ്രൈമറുകൾക്ക് തന്നെ പൂരക ഘടനകൾ ഉണ്ടാകില്ല, അല്ലാത്തപക്ഷം പിസിആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷനെ ബാധിക്കുന്ന ഒരു ഹെയർപിൻ ഘടന രൂപപ്പെടും.

◆ ATCG പ്രൈമർ ശ്രേണിയിൽ കഴിയുന്നത്ര തുല്യമായി വിതരണം ചെയ്യണം, കൂടാതെ 3′ ടെർമിനൽ ബേസ് ടി ആയി ഒഴിവാക്കണം.

അനുബന്ധം1：Cell നേരിട്ട്RT-qPCR കിറ്റ് കമ്പോണൻടി സപ്ലിമെന്റ് പായ്ക്ക്

1.സെൽ ലിസിസ് സൊല്യൂഷൻ