ഇമ്യൂണോഗ്ലോബുലിൻസ് (Ig) എന്നും അറിയപ്പെടുന്ന ആന്റിബോഡികൾ ആന്റിജനുകളുമായി പ്രത്യേകമായി ബന്ധിപ്പിക്കുന്ന ഗ്ലൈക്കോപ്രോട്ടീനുകളാണ്.
 
പരമ്പരാഗത ആന്റിബോഡി തയ്യാറാക്കൽ മൃഗങ്ങൾക്ക് പ്രതിരോധ കുത്തിവയ്പ്പിലൂടെയും ആന്റിസെറം ശേഖരിച്ചും നിർമ്മിക്കുന്നു.അതിനാൽ, ആന്റിസെറത്തിൽ സാധാരണയായി മറ്റ് ബന്ധമില്ലാത്ത ആന്റിജനുകൾക്കും സെറത്തിലെ മറ്റ് പ്രോട്ടീൻ ഘടകങ്ങൾക്കും എതിരായ ആന്റിബോഡികൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.പൊതുവായ ആന്റിജൻ തന്മാത്രകളിൽ കൂടുതലും ഒന്നിലധികം വ്യത്യസ്ത എപ്പിറ്റോപ്പുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, അതിനാൽ പരമ്പരാഗത ആന്റിബോഡികൾ ഒന്നിലധികം വ്യത്യസ്ത എപ്പിടോപ്പുകൾക്കെതിരായ ആന്റിബോഡികളുടെ മിശ്രിതമാണ്.ഒരേ എപ്പിറ്റോപ്പിനെതിരെയുള്ള പരമ്പരാഗത സെറം ആന്റിബോഡികൾ പോലും ഇപ്പോഴും വ്യത്യസ്ത ബി സെൽ ക്ലോണുകൾ ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കുന്ന വൈവിധ്യമാർന്ന ആന്റിബോഡികൾ അടങ്ങിയതാണ്.അതിനാൽ, പരമ്പരാഗത സെറം ആന്റിബോഡികളെ പോളിക്ലോണൽ ആന്റിബോഡികൾ എന്നും ചുരുക്കത്തിൽ പോളിക്ലോണൽ ആന്റിബോഡികൾ എന്നും വിളിക്കുന്നു.
 
മോണോക്ലോണൽ ആന്റിബോഡി (മോണോക്ലോണൽ ആൻറിബോഡി) ഒരു ബി സെൽ ക്ലോണിലൂടെ ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കപ്പെടുന്ന ഉയർന്ന ഏകീകൃത ആന്റിബോഡിയാണ്.ഇത് സാധാരണയായി ഹൈബ്രിഡോമ സാങ്കേതികവിദ്യയാണ് തയ്യാറാക്കുന്നത് - ഹൈബ്രിഡോമ ആന്റിബോഡി സാങ്കേതികവിദ്യ സെൽ ഫ്യൂഷൻ സാങ്കേതികവിദ്യയെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാണ്, ബി സെല്ലുകളെ സംയോജിപ്പിച്ച് നിർദ്ദിഷ്ട ആന്റിബോഡികളും അനന്തമായ വളർച്ചാ ശേഷിയുള്ള മൈലോമ കോശങ്ങളും ബി-സെൽ ഹൈബ്രിഡോമകളിലേക്ക് സ്രവിക്കാനുള്ള കഴിവ് നൽകുന്നു.ഈ ഹൈബ്രിഡോമ സെല്ലിന് ഒരു പാരന്റ് സെല്ലിന്റെ സവിശേഷതകളുണ്ട്.ഇതിന് മൈലോമ കോശങ്ങൾ പോലെ വിട്രോയിൽ അനിശ്ചിതമായും അനശ്വരമായും പെരുകാൻ കഴിയും, കൂടാതെ പ്ലീനിക് ലിംഫോസൈറ്റുകൾ പോലുള്ള നിർദ്ദിഷ്ട ആന്റിബോഡികളെ സമന്വയിപ്പിക്കാനും സ്രവിക്കാനും ഇതിന് കഴിയും.ക്ലോണിംഗിലൂടെ, ഒരൊറ്റ ഹൈബ്രിഡോമ സെല്ലിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ ഒരു മോണോക്ലോണൽ ലൈൻ, അതായത് ഹൈബ്രിഡോമ സെൽ ലൈൻ ലഭിക്കും.ഇത് ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന ആന്റിബോഡികൾ ഒരേ ആന്റിജനിക് ഡിറ്റർമിനന്റിനെതിരെ, അതായത് മോണോക്ലോണൽ ആന്റിബോഡികൾക്കെതിരെ ഉയർന്ന ഏകീകൃത ആന്റിബോഡികളാണ്.
 
ഒന്നോ അതിലധികമോ Y ആകൃതിയിലുള്ള മോണോമറുകളായി (അതായത്, മോണോക്ലോണൽ ആന്റിബോഡികൾ അല്ലെങ്കിൽ പോളിക്ലോണൽ ആന്റിബോഡികൾ) ആന്റിബോഡികൾ നിലവിലുണ്ട്.ഓരോ Y-ആകൃതിയിലുള്ള മോണോമറും 4 പോളിപെപ്റ്റൈഡ് ശൃംഖലകൾ ഉൾക്കൊള്ളുന്നു, അതിൽ രണ്ട് സമാനമായ കനത്ത ചെയിനുകളും രണ്ട് സമാന ലൈറ്റ് ചെയിനുകളും ഉൾപ്പെടുന്നു.ലൈറ്റ് ചെയിൻ, ഹെവി ചെയിൻ എന്നിവ അവയുടെ തന്മാത്രാ ഭാരം അനുസരിച്ച് നാമകരണം ചെയ്യപ്പെടുന്നു.Y- ആകൃതിയിലുള്ള ഘടനയുടെ മുകൾഭാഗം വേരിയബിൾ മേഖലയാണ്, ഇത് ആന്റിജൻ ബൈൻഡിംഗ് സൈറ്റാണ്.(Detai ബയോ-മോണോക്ലോണൽ ആന്റിബോഡി ആശയത്തിൽ നിന്നുള്ള ഉദ്ധരണി)
 
ആന്റിബോഡി ഘടന
കനത്ത ചെയിൻ
ഗ്രീക്ക് അക്ഷരങ്ങളായ α, δ, ε, γ, μ എന്നിങ്ങനെ അഞ്ച് തരം സസ്തനി Ig ഹെവി ചെയിനുകൾ ഉണ്ട്.അനുബന്ധ ആന്റിബോഡികളെ IgA, IgD, IgE, IgG, IgM എന്ന് വിളിക്കുന്നു.വ്യത്യസ്ത കനത്ത ശൃംഖലകൾ വലുപ്പത്തിലും ഘടനയിലും വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു.α, γ എന്നിവയിൽ ഏകദേശം 450 അമിനോ ആസിഡുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, അതേസമയം μ, ε എന്നിവയിൽ ഏകദേശം 550 അമിനോ ആസിഡുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.
ഓരോ കനത്ത ശൃംഖലയ്ക്കും രണ്ട് മേഖലകളുണ്ട്: സ്ഥിരമായ മേഖലയും വേരിയബിൾ മേഖലയും.ഒരേ തരത്തിലുള്ള എല്ലാ ആന്റിബോഡികൾക്കും ഒരേ സ്ഥിരമായ പ്രദേശമുണ്ട്, എന്നാൽ വ്യത്യസ്ത തരത്തിലുള്ള ആന്റിബോഡികൾ തമ്മിൽ വ്യത്യാസമുണ്ട്.കനത്ത ശൃംഖലകളുടെ സ്ഥിരമായ പ്രദേശങ്ങളായ γ, α, δ എന്നിവ മൂന്ന് Ig ഡൊമെയ്‌നുകൾ ചേർന്നതാണ്, അതിന്റെ വഴക്കം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് ഒരു ഹിഞ്ച് മേഖലയുണ്ട്;കനത്ത ശൃംഖലകളുടെ സ്ഥിരമായ പ്രദേശങ്ങൾ μ, ε എന്നിവ 4 Ig ഡൊമെയ്‌നുകൾ ചേർന്നതാണ്.വ്യത്യസ്ത ബി സെല്ലുകൾ നിർമ്മിക്കുന്ന ആന്റിബോഡിയുടെ കനത്ത ശൃംഖലയുടെ വേരിയബിൾ പ്രദേശം വ്യത്യസ്തമാണ്, എന്നാൽ അതേ ബി സെൽ അല്ലെങ്കിൽ സെൽ ക്ലോൺ നിർമ്മിക്കുന്ന ആന്റിബോഡിയുടെ വേരിയബിൾ മേഖല ഒന്നുതന്നെയാണ്, കൂടാതെ ഓരോ ഹെവി ചെയിനിന്റെയും വേരിയബിൾ മേഖല ഏകദേശം 110 അമിനോ ആസിഡുകൾ നീളമുള്ളതാണ്., കൂടാതെ ഒരൊറ്റ Ig ഡൊമെയ്‌ൻ രൂപീകരിക്കുക.
 
ലൈറ്റ് ചെയിൻ
സസ്തനികളിൽ രണ്ട് തരം ലൈറ്റ് ചെയിനുകൾ മാത്രമേയുള്ളൂ: ലാംഡ തരം, കപ്പ തരം.ഓരോ ലൈറ്റ് ചെയിനിനും രണ്ട് ലിങ്ക്ഡ് ഡൊമെയ്‌നുകൾ ഉണ്ട്: ഒരു സ്ഥിരമായ പ്രദേശവും ഒരു വേരിയബിൾ മേഖലയും.ലൈറ്റ് ചെയിനിന്റെ നീളം ഏകദേശം 211~217 അമിനോ ആസിഡുകളാണ്.ഓരോ ആന്റിബോഡിയിലും അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന രണ്ട് ലൈറ്റ് ചെയിനുകൾ എല്ലായ്പ്പോഴും സമാനമാണ്.സസ്തനികൾക്ക്, ഓരോ ആന്റിബോഡിയിലെയും ലൈറ്റ് ചെയിൻ ഒരു തരം മാത്രമേയുള്ളൂ: കപ്പ അല്ലെങ്കിൽ ലാംഡ.തരുണാസ്ഥി മത്സ്യങ്ങൾ (തരുണാസ്ഥി മത്സ്യങ്ങൾ), അസ്ഥി മത്സ്യങ്ങൾ തുടങ്ങിയ ചില താഴ്ന്ന കശേരുക്കളിൽ, അയോട്ട (അയോട്ട) തരം പോലുള്ള മറ്റ് തരത്തിലുള്ള ലൈറ്റ് ചെയിനുകളും കാണപ്പെടുന്നു.
 
Fab, Fc സെഗ്‌മെന്റുകൾ
എഫ്‌സി സെഗ്‌മെന്റിനെ എൻസൈമുകളുമായോ ഫ്ലൂറസെന്റ് ഡൈകളുമായോ നേരിട്ട് സംയോജിപ്പിച്ച് ആന്റിബോഡികൾ ലേബൽ ചെയ്യാൻ കഴിയും.ELISA പ്രക്രിയയിൽ പ്ലേറ്റിൽ ആന്റിബോഡി റിവറ്റ് ചെയ്യുന്ന ഭാഗമാണിത്, കൂടാതെ രണ്ടാമത്തെ ആന്റിബോഡിയെ തിരിച്ചറിയുകയും ഇമ്മ്യൂണോപ്രെസിപിറ്റേഷൻ, ഇമ്മ്യൂണോബ്ലോട്ടിംഗ്, ഇമ്മ്യൂണോഹിസ്റ്റോകെമിസ്ട്രി എന്നിവയിൽ ബന്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്ന ഭാഗം കൂടിയാണിത്.ആന്റിബോഡികളെ രണ്ട് എഫ്(എബി) സെഗ്‌മെന്റുകളായും ഒരു എഫ്‌സി സെഗ്‌മെന്റായും പപ്പെയ്‌ൻ പോലുള്ള പ്രോട്ടിയോലൈറ്റിക് എൻസൈമുകളാൽ ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യാം, അല്ലെങ്കിൽ പെപ്‌സിൻ ഉപയോഗിച്ച് അവയെ ഹിഞ്ച് മേഖലയിൽ നിന്ന് തകർത്ത് ഒരു എഫ്(എബി) 2 സെഗ്‌മെന്റിലേക്കും ഒരു എഫ്‌സി സെഗ്‌മെന്റിലേക്കും ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യാം.IgG ആന്റിബോഡി ശകലങ്ങൾ ചിലപ്പോൾ വളരെ ഉപയോഗപ്രദമാണ്.എഫ്‌സി സെഗ്‌മെന്റിന്റെ അഭാവം കാരണം, എഫ്(എബി) സെഗ്‌മെന്റ് ആന്റിജനുമായി അടിഞ്ഞുകൂടില്ല, അല്ലെങ്കിൽ വിവോ പഠനങ്ങളിൽ രോഗപ്രതിരോധ കോശങ്ങൾ പിടിച്ചെടുക്കുകയുമില്ല.ചെറിയ തന്മാത്രാ ശകലങ്ങളും ക്രോസ്-ലിങ്കിംഗ് ഫംഗ്‌ഷന്റെ അഭാവവും (എഫ്‌സി സെഗ്‌മെന്റിന്റെ അഭാവം കാരണം), ഫങ്ഷണൽ പഠനങ്ങളിൽ ഫാബ് സെഗ്‌മെന്റ് സാധാരണയായി റേഡിയോ ലേബലിംഗിനായി ഉപയോഗിക്കുന്നു, കൂടാതെ എഫ്‌സി സെഗ്‌മെന്റ് പ്രധാനമായും ഹിസ്റ്റോകെമിക്കൽ സ്റ്റെയിനിംഗിൽ തടയുന്ന ഏജന്റായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.
 
വേരിയബിൾ, സ്ഥിരമായ പ്രദേശങ്ങൾ
N-ടെർമിനസിനടുത്തുള്ള H ചെയിനിന്റെ 1/5 അല്ലെങ്കിൽ 1/4 (ഏകദേശം 118 അമിനോ ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു) ലും L ശൃംഖലയുടെ N- ടെർമിനസിന് സമീപം 1/2 (ഏകദേശം 108-111 അമിനോ ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു) എന്ന നിലയിലുമാണ് വേരിയബിൾ മേഖല (V മേഖല) സ്ഥിതി ചെയ്യുന്നത്.ഓരോ V മേഖലയിലും ഇൻട്രാ-ചെയിൻ ഡൈസൾഫൈഡ് ബോണ്ടുകളാൽ രൂപപ്പെട്ട ഒരു പെപ്റ്റൈഡ് റിംഗ് ഉണ്ട്, ഓരോ പെപ്റ്റൈഡ് വളയത്തിലും ഏകദേശം 67 മുതൽ 75 വരെ അമിനോ ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.V മേഖലയിലെ അമിനോ ആസിഡുകളുടെ ഘടനയും ക്രമീകരണവും ആന്റിബോഡിയുടെ ആന്റിജൻ ബൈൻഡിംഗ് പ്രത്യേകതയെ നിർണ്ണയിക്കുന്നു.V മേഖലയിലെ അമിനോ ആസിഡുകളുടെ നിരന്തരം മാറിക്കൊണ്ടിരിക്കുന്ന തരങ്ങളും ക്രമവും കാരണം, വ്യത്യസ്ത ബൈൻഡിംഗ് ആന്റിജൻ പ്രത്യേകതകളുള്ള പല തരത്തിലുള്ള ആന്റിബോഡികൾ രൂപപ്പെടാം.എൽ ചെയിനിന്റെയും എച്ച് ചെയിനിന്റെയും വി മേഖലകളെ യഥാക്രമം വിഎൽ, വിഎച്ച് എന്ന് വിളിക്കുന്നു.VL, VH എന്നിവയിൽ, ചില പ്രാദേശിക പ്രദേശങ്ങളുടെ അമിനോ ആസിഡ് ഘടനയും ക്രമവും ഉയർന്ന അളവിലുള്ള വ്യതിയാനമാണ്.ഈ പ്രദേശങ്ങളെ ഹൈപ്പർവേരിയബിൾ മേഖലകൾ (HVR) എന്ന് വിളിക്കുന്നു.V മേഖലയിലെ എച്ച്വിആർ ഇതര ഭാഗങ്ങളുടെ അമിനോ ആസിഡ് ഘടനയും ക്രമീകരണവും താരതമ്യേന യാഥാസ്ഥിതികമാണ്, ഇതിനെ ഫ്രെയിംവർക്ക് മേഖല എന്ന് വിളിക്കുന്നു.VL-ൽ മൂന്ന് ഹൈപ്പർവേരിയബിൾ മേഖലകളുണ്ട്, സാധാരണയായി യഥാക്രമം 24 മുതൽ 34 വരെയും 89 മുതൽ 97 വരെയും അമിനോ ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങളിൽ സ്ഥിതി ചെയ്യുന്നു.VL, VH എന്നിവയുടെ മൂന്ന് HVR-കളെ യഥാക്രമം HVR1, HVR2, HVR3 എന്ന് വിളിക്കുന്നു.എക്സ്-റേ ക്രിസ്റ്റൽ ഡിഫ്രാക്ഷന്റെ ഗവേഷണവും വിശകലനവും ഹൈപ്പർവേരിയബിൾ പ്രദേശം തീർച്ചയായും ആന്റിബോഡി ആന്റിജൻ ബന്ധിപ്പിക്കുന്ന സ്ഥലമാണെന്ന് തെളിയിച്ചു, അതിനാൽ ഇതിനെ കോംപ്ലിമെന്ററിറ്റി ഡിറ്റർമിനിംഗ് റീജിയൻ (സിഡിആർ) എന്ന് വിളിക്കുന്നു.VL, VH എന്നിവയുടെ HVR1, HVR2, HVR3 എന്നിവയെ യഥാക്രമം CDR1, CDR2, CDR3 എന്ന് വിളിക്കാം.സാധാരണയായി, CDR3 ന് ഉയർന്ന അളവിലുള്ള ഹൈപ്പർവേരിയബിലിറ്റി ഉണ്ട്.Ig തന്മാത്രകളുടെ ഇഡിയോടൈപ്പിക് ഡിറ്റർമിനന്റുകൾ നിലനിൽക്കുന്ന പ്രധാന സ്ഥലവും ഹൈപ്പർവേരിയബിൾ മേഖലയാണ്.മിക്ക കേസുകളിലും, ആന്റിജനുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുന്നതിൽ എച്ച് ചെയിൻ കൂടുതൽ പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നു.
സ്ഥിരമായ മേഖല (സി മേഖല)സി ടെർമിനസിനടുത്തുള്ള എച്ച് ചെയിനിന്റെ 3/4 അല്ലെങ്കിൽ 4/5 (ഏകദേശം അമിനോ ആസിഡ് 119 മുതൽ സി ടെർമിനൽ വരെ), എൽ ശൃംഖലയുടെ സി ടെർമിനസിന് സമീപം 1/2 (ഏകദേശം 105 അമിനോ ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു) സ്ഥിതി ചെയ്യുന്നു.എച്ച് ശൃംഖലയിലെ ഓരോ പ്രവർത്തന മേഖലയിലും ഏകദേശം 110 അമിനോ ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, കൂടാതെ ഡിസൾഫൈഡ് ബോണ്ടുകളാൽ ബന്ധിപ്പിച്ച 50-60 അമിനോ ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങൾ അടങ്ങിയ പെപ്റ്റൈഡ് റിംഗ് അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.ഈ പ്രദേശത്തിന്റെ അമിനോ ആസിഡിന്റെ ഘടനയും ക്രമീകരണവും ഒരേ ജന്തു Ig ഐസോടൈപ്പ് എൽ ചെയിനിലും അതേ തരം H ചെയിനിലും താരതമ്യേന സ്ഥിരമാണ്.അതുപോലെ, ഇതിന് അനുബന്ധ ആന്റിജനുമായി മാത്രമേ പ്രത്യേകമായി ബന്ധിപ്പിക്കാൻ കഴിയൂ, എന്നാൽ അതിന്റെ സി മേഖലയുടെ ഘടന ഒന്നുതന്നെയാണ്, അതായത്, ഇതിന് ഒരേ ആന്റിജെനിസിറ്റി ഉണ്ട്.വ്യത്യസ്ത എക്സോടോക്സിനുകൾക്കെതിരെയുള്ള രണ്ട് എ കോമ്പിനേഷൻ ആന്റിബോഡികളുമായി (ഐജിജി) കുതിര ആന്റി-ഹ്യൂമൻ ഐജിജി സെക്കൻഡറി ആന്റിബോഡി (അല്ലെങ്കിൽ ആന്റി-ആന്റിബോഡി) സംയോജിപ്പിക്കാം.ദ്വിതീയ ആന്റിബോഡികൾ തയ്യാറാക്കുന്നതിനും ഫ്ലൂറസിൻ, ഐസോടോപ്പുകൾ, എൻസൈമുകൾ, മറ്റ് ലേബൽ ചെയ്ത ആന്റിബോഡികൾ എന്നിവ പ്രയോഗിക്കുന്നതിനും ഇത് ഒരു പ്രധാന അടിസ്ഥാനമാണ്.
 
 
ബന്ധപ്പെട്ട ഉല്പന്നങ്ങൾ:
സെൽ ഡയറക്ട് RT-qPCR കിറ്റ്