പരീക്ഷണ ഉദ്യോഗസ്ഥരുടെ പെരുമാറ്റം മാനദണ്ഡമാക്കുന്നതിന് PCR പരീക്ഷണം SOP സ്ഥാപിക്കുക.
പരീക്ഷണം നടത്തുന്നയാൾ പ്രവർത്തന നടപടിക്രമങ്ങൾ കർശനമായി പാലിക്കുകയും മാനുഷിക ഘടകങ്ങൾ മൂലമുണ്ടാകുന്ന പിസിആർ മലിനീകരണം കുറയ്ക്കുകയും മലിനീകരണം ഉണ്ടാകുന്നത് തടയുകയും ചെയ്യുന്നു.കൂടാതെ, അനുബന്ധ ഉപകരണങ്ങൾ പ്രവർത്തിപ്പിക്കുന്നതിൽ വൈദഗ്ദ്ധ്യം, മുഴുവൻ ജോലി പ്രക്രിയയും വ്യക്തമാക്കൽ, മലിനീകരണ ചികിത്സാ രീതികൾ, ലബോറട്ടറി ഗുണനിലവാര നിയന്ത്രണ രീതികൾ എന്നിവയിൽ വൈദഗ്ദ്ധ്യം നേടുക, പരിശോധനാ ഫലങ്ങൾ ശരിയായി വ്യാഖ്യാനിക്കാൻ കഴിയുക എന്നിവ ഉൾപ്പെടെയുള്ള പ്രൊഫഷണൽ അറിവും കഴിവുകളും പരീക്ഷണാർത്ഥിക്ക് ഉണ്ടായിരിക്കണം.
ഒരു സാധാരണ PCR ലബോറട്ടറി സ്ഥാപിക്കുക.
പിസിആർ ലബോറട്ടറിയെ തത്വത്തിൽ നാല് മേഖലകളായി തിരിച്ചിരിക്കുന്നു, അതായത് റീജന്റ് തയ്യാറാക്കൽ ഏരിയ, സാമ്പിൾ പ്രോസസ്സിംഗ് ഏരിയ, ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഏരിയ, ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഉൽപ്പന്ന വിശകലന ഏരിയ.ആദ്യത്തെ രണ്ട് ഏരിയകൾ പ്രീ-ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഏരിയകളാണ്, അവസാന രണ്ട് ഏരിയകൾ പോസ്റ്റ്-ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഏരിയകളാണ്.പ്രീ-ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ സോണും പോസ്റ്റ്-ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ സോണും കർശനമായി വേർതിരിക്കേണ്ടതാണ്.പരീക്ഷണ സാമഗ്രികൾ, റിയാജന്റുകൾ, റെക്കോർഡിംഗ് പേപ്പർ, പേനകൾ, ക്ലീനിംഗ് മെറ്റീരിയലുകൾ മുതലായവയ്ക്ക് പ്രീ-ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഏരിയയിൽ നിന്ന് പോസ്റ്റ്-ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഏരിയയിലേക്ക് മാത്രമേ ഒഴുകാൻ കഴിയൂ, അതായത്, റീജന്റ് തയ്യാറാക്കൽ ഏരിയ → സാമ്പിൾ പ്രോസസ്സിംഗ് ഏരിയ → ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഏരിയ → ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഉൽപ്പന്ന വിശകലന ഏരിയ, പിന്നിലേക്ക് ഒഴുകരുത് .ലബോറട്ടറിയിലെ വായുപ്രവാഹം പ്രീ-ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഏരിയയിൽ നിന്ന് പോസ്റ്റ്-ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഏരിയയിലേക്ക് ഒഴുകണം, പിന്നിലേക്ക് ഒഴുകരുത്.അനുയോജ്യമായ പിസിആർ ലബോറട്ടറി ഡിസൈൻ ചുവടെ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു:
ചിത്രം എ: ബഫർ റൂമിൽ നെഗറ്റീവ് മർദ്ദമുള്ള അനുയോജ്യമായ PCR ലബോറട്ടറി സജ്ജീകരണ മോഡ്
ചിത്രം ബി: ബഫർ റൂമിൽ പോസിറ്റീവ് മർദ്ദമുള്ള അനുയോജ്യമായ PCR ലബോറട്ടറി സജ്ജീകരണ മോഡ്
ചിത്രം A, ചിത്രം B എന്നിവയിൽ നൽകിയിരിക്കുന്ന PCR ലബോറട്ടറി സജ്ജീകരണ ഡയഗ്രമുകൾ കൂടുതൽ അനുയോജ്യമായ സജ്ജീകരണ മോഡ് ആയിരിക്കണം, കൂടാതെ വ്യവസ്ഥകളുള്ള ലബോറട്ടറിക്ക് ഈ മോഡ് രൂപകൽപ്പന ചെയ്യാൻ കഴിയും.സാധാരണ ലബോറട്ടറികൾക്ക്, പിസിആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഏരിയയും ഉൽപ്പന്ന വിശകലന ഏരിയയും വേർതിരിക്കാമെന്ന് ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു, കൂടാതെ സാമ്പിൾ തയ്യാറാക്കൽ ഏരിയയിലും പിസിആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഏരിയയിലും കവറിന്റെ തുറക്കൽ കഴിയുന്നത്ര കുറയ്ക്കണം.ഓർമ്മിക്കുക: ഉൽപ്പന്ന വിശകലന ഏരിയയിലെ ഉൽപ്പന്നങ്ങളും പരീക്ഷണാത്മക വിതരണങ്ങളും സാമ്പിൾ തയ്യാറാക്കൽ ഏരിയയിലേക്കും PCR ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഏരിയയിലേക്കും കൊണ്ടുപോകുന്നത് കർശനമായി നിരോധിച്ചിരിക്കുന്നു.
ലബോറട്ടറി പിസിആർ കണ്ടെത്തലും തിരിച്ചറിയലും മാത്രമാണ് നടത്തുന്നതെങ്കിൽ, പരമ്പരാഗത പിസിആറിന് പകരം ഫ്ലൂറസെന്റ് ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് പിസിആർ ഉപയോഗിക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.
ഫ്ലൂറസെൻസ് ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് പിസിആർ കണ്ടെത്തൽ ഫലങ്ങൾ ഫ്ലൂറസെൻസ് സിഗ്നലുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ശേഖരിക്കാനും വിശകലനം ചെയ്യാനും കഴിയും, അതിനാൽ പ്രതികരണത്തിന് ശേഷം ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിനായി ലിഡ് തുറക്കേണ്ട ആവശ്യമില്ല, ഇത് എയറോസോളുകൾ രൂപപ്പെടുത്തുന്നതിന് പ്രതികരണ ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ ചോർച്ച മൂലമുണ്ടാകുന്ന പിസിആർ ഉൽപ്പന്ന മലിനീകരണം ഒഴിവാക്കുന്നു.ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിന്റെ ലോഡിംഗ് ഘട്ടത്തിൽ നിങ്ങൾ ക്യാപ് ഓപ്പണിംഗുകളുടെ എണ്ണം വർദ്ധിപ്പിക്കുകയാണെങ്കിൽ, എയറോസോൾ മലിനീകരണം ഉണ്ടാകാൻ സാധ്യതയുണ്ട്.ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് പിസിആറിന്റെ പ്രയോഗം പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കാനും ക്രമേണ ഗുണപരമായ പിസിആർ മാറ്റിസ്ഥാപിക്കാനും ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.
പിസിആർ പ്രതികരണത്തിനായി യുഎൻജി ആന്റി-പിസിആർ ഉൽപ്പന്ന മലിനീകരണ സംവിധാനം ഉപയോഗിക്കുന്നു.
സിസ്റ്റം dTTP-ക്ക് പകരം dUTP ഉപയോഗിക്കുന്നു.PCR പ്രതികരണത്തിന് ശേഷം, എല്ലാ PCR ഉൽപ്പന്നങ്ങളും (DNA ശകലങ്ങൾ) dUTP-യിൽ സംയോജിപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു;പിസിആർ പ്രതികരണത്തിന്റെ അടുത്ത റൗണ്ടിൽ, സിസ്റ്റത്തിൽ ചേർത്ത യുഎൻജി എൻസൈം പിസിആറിന് 5 മിനിറ്റ് മുമ്പ് 37 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുന്നു, ഇത് ഡിയുടിപി അടങ്ങിയ എല്ലാ ഡിഎൻഎ ശകലങ്ങളെയും പ്രത്യേകമായി തരംതാഴ്ത്തുകയും പിന്നീട് പിസിആർ പ്രതികരണം നടത്തുകയും ചെയ്യും.ഇത് പിസിആർ ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ മൂലമുണ്ടാകുന്ന എയറോസോൾ മലിനീകരണം പൂർണ്ണമായും നീക്കം ചെയ്യും.പ്രഭാവം ചുവടെയുള്ള ചിത്രത്തിൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു:
കുറിപ്പ്: നേരിട്ടുള്ള പിസിആർ സീരീസിനായി, ഫോർജീനിന്റെ ആന്റി-പിസിആർ ഉൽപ്പന്ന മലിനീകരണ സംവിധാനത്തിന്റെ സീരീസ് ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ നിങ്ങൾക്ക് തിരഞ്ഞെടുക്കാം.നിർദ്ദേശിക്കുക
വലിയ തോതിലുള്ള ജനിതകമാറ്റം പരിശോധന നടത്തുന്ന ലബോറട്ടറികൾക്കായി, യുഎൻജി ആന്റി-പിസിആർ ഉൽപ്പന്ന മലിനീകരണ സംവിധാനം ഉപയോഗിക്കുന്നതിന്, ന്യായമായ ലബോറട്ടറികളുടെ നിർമ്മാണത്തിന് പുറമേ, റിയാക്ടറുകൾ പരിശോധിക്കുന്നതിന് ശക്തമായി ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.
ഓർമ്മപ്പെടുത്തൽ: ഈ സിസ്റ്റത്തിന്റെ ഉപയോഗത്തിന് ഇതിനകം കാരണമായ PCR ഉൽപ്പന്ന മലിനീകരണം നീക്കം ചെയ്യാൻ കഴിയില്ല.അതിനാൽ, പ്രസക്തമായ പരിശോധനയുടെ തുടക്കത്തിൽ യുഎൻജി സിസ്റ്റം ഉപയോഗിക്കണം, കൂടാതെ പിസിആർ ഉൽപന്നങ്ങളുടെ ഫാൾസ് പോസിറ്റീവ് മലിനീകരണം തടയുന്നതിന് പിസിആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷനായി യുഎൻജി സിസ്റ്റം ഉപയോഗിക്കണം.
വലിയ തോതിലുള്ള പരിശോധനകൾ നടത്തുമ്പോൾ, നേരിട്ടുള്ള പിസിആർ-യുഎൻജി ഫോർജിൻ സിസ്റ്റം ഉപയോഗിക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു:
ചെടിയുടെ ഇല നേരിട്ട് PCR കിറ്റ്-UNG
പ്ലാന്റ് സീഡ് ഡയറക്ട് പിസിആർ കിറ്റ്-യുഎൻജി
അനിമൽ ടിഷ്യൂ ഡയറക്ട് പിസിആർ കിറ്റ്-യുഎൻജി
മൗസ് ടെയിൽ ഡയറക്ട് പിസിആർ കിറ്റ്-യുഎൻജി
സീബ്രാ ഫിഷ് ഡയറക്ട് പിസിആർ കിറ്റ്-യുഎൻജി.
ഫോർജീനിൽ നിന്നുള്ള കിറ്റുകളുടെ ഈ ശ്രേണിവേഗത്തിലും വലിയ തോതിലും പിസിആർ കണ്ടെത്തൽ നടത്താൻ മാത്രമല്ല, പിസിആർ ഉൽപ്പന്ന മലിനീകരണം ഫലപ്രദമായി തടയാനും നിയന്ത്രിക്കാനും കഴിയും.
പോസ്റ്റ് സമയം: മാർച്ച്-19-2021
