-
അനിമൽ ടിഷ്യു ഡയറക്ട് പിസിആർ കിറ്റ്-യു‌എൻ‌ജി
പിസിആർ പ്രതിപ്രവർത്തനങ്ങൾ‌ക്കായി മൃഗങ്ങളുടെ ടിഷ്യു സാമ്പിളുകളിൽ നിന്നും ജീനോമിക് ഡി‌എൻ‌എ വേഗത്തിൽ പുറത്തുവിടുന്നതിന് ഈ കിറ്റ് ഒരു അദ്വിതീയ ലിസിസ് ബഫർ സിസ്റ്റം ഉപയോഗിക്കുന്നു, അതിനാൽ ഇത് വലിയ തോതിലുള്ള ജനിതക പരിശോധനയ്ക്ക് അനുയോജ്യമാണ്.
ലിസിസ് ബഫറിൽ നിന്ന് ജീനോമിക് ഡി‌എൻ‌എ പുറത്തുവിടുന്ന പ്രക്രിയ 10-30 മിനിറ്റിനുള്ളിൽ 65 ന് പൂർത്തിയാക്കുന്നു°C. പ്രോട്ടീൻ, ആർ‌എൻ‌എ നീക്കംചെയ്യൽ പോലുള്ള മറ്റ് പ്രക്രിയകളൊന്നും ആവശ്യമില്ല, കൂടാതെ റിലീസ് ചെയ്ത ട്രെയ്സ് ഡി‌എൻ‌എ പിസിആർ പ്രതികരണത്തിനുള്ള ടെംപ്ലേറ്റായി ഉപയോഗിക്കാൻ കഴിയും.
2×പിസിആർ ഈസിടി.എം. മിക്സ് (യു‌എൻ‌ജി) 2 ന്റെ അടിസ്ഥാനത്തിൽ ഡി‌ടി‌ടി‌പിക്കുപകരം dUTP ഉപയോഗിക്കുന്നു×പിസിആർ ഈസിടി.എം. ഒരേ സമയം dUTP അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന ടെംപ്ലേറ്റിനെ തരംതാഴ്ത്താൻ കഴിയുന്ന UNG എൻസൈം (യുറസിൽ-എൻ-ഗ്ലൈക്കോസൈലേസ്) കലർത്തി ചേർക്കുക. പിസിആർ പ്രതികരണത്തിന് മുമ്പ്, യുറസിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന പിസിആർ ഉൽ‌പ്പന്നത്തെ തരംതാഴ്ത്താൻ യു‌എൻ‌ജി എൻസൈം ഉപയോഗിക്കുന്നു. യുറസിൽ അടങ്ങിയിട്ടില്ലാത്ത ടെം‌പ്ലേറ്റിൽ യു‌എൻ‌ജി എൻ‌സൈമിന് യാതൊരു ഫലവും ഉണ്ടാകില്ല, അതുവഴി ആംപ്ലിഫിക്കേഷന്റെ പ്രത്യേകതയും കൃത്യതയും ഉറപ്പാക്കുകയും വലിയ തോതിലുള്ള ജനിതക പരിശോധനയ്ക്കിടെ പിസിആർ ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ മലിനമാകാനുള്ള സാധ്യത തടയുകയും ചെയ്യുന്നു.
നേരിട്ടുള്ള പിസിആർ പ്രതിപ്രവർത്തനങ്ങൾ‌ക്കായി ഫോർ‌ജെൻ പ്രത്യേകം വികസിപ്പിച്ചെടുത്ത ഡി‌എൻ‌എ പോളിമറേസാണ് ഡി-തക് ഡി‌എൻ‌എ പോളിമറേസ്. ഡി-ടാക് ഡി‌എൻ‌എ പോളിമറേസിന് വിവിധതരം പിസിആർ പ്രതികരണ ഇൻ‌ഹിബിറ്ററുകളോട് ശക്തമായ സഹിഷ്ണുതയുണ്ട്, മാത്രമല്ല വിവിധ സങ്കീർ‌ണ്ണ പ്രതികരണ സംവിധാനങ്ങളിൽ ഡിഎൻ‌എയുടെ അളവ് കാര്യക്ഷമമായി വർദ്ധിപ്പിക്കാനും കഴിയും, കൂടാതെ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ വേഗത 2 കെബി / മിനിറ്റിലെത്താൻ കഴിയും, ഇത് നേരിട്ടുള്ള പിസിആർ പ്രതികരണത്തിന് അനുയോജ്യമാണ്.
